概述

• 更新2012年基因诊断“金标准”的必要性
• 达成全球共识的过程

面肩肱型肌营养不良症（FSHD）的临床与遗传特征

• 临床特征
  • 成人中第二常见的肌营养不良症
  • 缓慢进展，主要影响面部、肩部和上臂肌肉，常不对称
  • 临床表现差异大，从严重早发型到无症状或轻微症状
  • 典型体征及与家族史的关系
  • 患病率估计
• 遗传特征
  • 病因：肌肉细胞中胚胎转录因子DUX4的去抑制
  • D4Z4重复阵列的结构与位置
  • FSHD1：95%的患者由D4Z4重复阵列收缩至1 - 10个单位引起
  • 4qA和4qB单倍型，4qA多为致病型
  • FSHD2：约5%的患者由D4Z4重复阵列染色质修饰因子的致病变异引起，常见于SMCHD1基因

FSHD1

• 阈值与灰色区域
  • FSHD1（1 - 10 U）和灰色区域FSHD1（8 - 10 U）
  • 不同等位基因大小的外显率
• 新重排导致的FSHD1
  • 10% - 30%的病例由新发D4Z4重排引起
  • 性腺体细胞嵌合现象及对临床严重程度和遗传咨询的影响
• 更复杂的D4Z4等位基因
  • S和L等位基因：4qA - S和4qA - L
  • 复杂等位基因：DPED等位基因、顺式重复、杂合等位基因、染色体易位等
  • 对准确诊断的干扰
• 不同种族背景下的FSHD1阈值
  • 日本和韩国患者4qA重复阵列大小为1 - 6 U，7 - 10 U致病性较低
  • 非洲裔患者的FSHD情况及可能影响因素

FSHD2

• DNA甲基化
  • 病因：D4Z4重复阵列染色质修饰因子的致病变异，常见于SMCHD1
  • 双基因遗传模式
  • 与FSHD1在8 - 10 U范围的重叠
  • 甲基化阈值及诊断意义
  • 未受影响和无症状携带者的追踪与告知
• SMCHD1测序
  • 数百种致病SMCHD1变异
  • 变异类型及常见热点
  • 数据库中变异的致病性判断
  • D4Z4甲基化分析对评估SMCHD1变异的重要性
• 下一代测序
  • 面板式下一代测序在神经肌肉疾病诊断中的应用
  • 偶然发现SMCHD1变异的处理

FSHD诊断的最低要求和建议

• 基因确认FSHD的最低标准
• 诊断测试的概述及临床与分子信息匹配的重要性

FSHD诊断技术

• 传统技术
  • 线性凝胶电泳后Southern印迹（SB - LGE）：分析1 - 10个单位的D4Z4重复阵列
  • 脉冲场凝胶电泳后Southern印迹（SB - PFGE）：分析长片段D4Z4重复阵列
• 新技术
  • 分子梳（MC）
  • 光学基因组图谱（OGM）
  • 全外显子组测序（WES）和全基因组测序（WGS）的局限性
  • 新技术在解决复杂病例中的优势

产前检测和植入前基因检测

• 遗传咨询的重要性
• 检测方法及局限性
  • FSHD1：评估D4Z4重复阵列大小
  • FSHD2：补充遗传分析
• 对母亲和胎儿的影响及孕前咨询的建议
• 植入前基因检测（PGT）
  • PGT - M定义及用途
    • 怀孕前筛选无特定遗传疾病胚胎
    • 用于家族性病例防单基因病遗传传递
  • FSHD患者PGT特点
    • 因技术限制，仅依赖间接检测
    • D4Z4重复阵列亚端粒位置使检测复杂
    • 有5%误诊风险，建议产前诊断确认
• 产前基因诊断（PND）
  • 检测方法
    • 直接与间接检测
    • 用绒毛取样（CVS）或羊水（AF）提取胎儿DNA
  • 样本分析
    • 羊水穿刺后需细胞培养
    • 绒毛足够可立即分析
  • 检测时间与选择
    • CVS在10 - 13周，AF在15 - 17周
    • 高遗传风险夫妇首选CVS
  • 结果确认与咨询
    • 直接检测需间接分析确认
    • 所有情况均需检测后遗传咨询
• PND和PGT特定场景建议
  • 8 - 10 U病例
    • 考虑评估致病基因变异能力及信息可用性
    • 因疾病外显不全和表现度可变，难预测表型
  • FSHD2（已知基因突变）
    • 先检测染色质修饰基因致病变异
    • 检测父母信息预测胎儿风险
    • 有变异时进一步基因分型

遗传咨询中临床变异性挑战与综合信息提供

• 临床与遗传异质性挑战
  • 诊断过程和基因型 - 表型关联困难
  • 专用评分标准规范临床体征识别
• 综合信息必要性
  • 无家族史检测应谨慎
  • 遗传咨询连接各方，评估患者和家族表型
• 检测前后遗传咨询
  • 检测前：讨论临床和分子问题
  • 检测后：解释结果，评估与临床匹配度，多学科评估